慢病毒包装

2016-03-14
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服务介绍
   慢病毒包装是慢病毒(Lentivirus)载体的构建过程重要的一环。慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)来源的一种病毒载体,慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装成为有感染力的病毒颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在细胞或活体组织中表达。

服务流程
1、目的基因克隆
2、慢病毒质粒载体构建
3、质粒载体大量抽提
4、载体大量包装与浓缩
5、滴度测定
6、获取稳定感染株
7、目的基因效率鉴定

客户提供
1、目的基因的名称、种属、序列或GeneBank Accession Number
2、对启动子和标记基因的要求信息
3、若需要检测靶基因的表达,需提供相应抗体或由公司代购

交付内容
1、1 ml慢病毒液和阴性对照100 μl,滴度大于等于1×108-9 UT/ml。
2、实验报告:详细操作步骤、质粒图谱、构建载体的测序报告、病毒鉴定数据,滴度测定报告及相关的外源基因表达分析。

项目列表

基因上调
项目内容周期
慢病毒质粒载体构建从克隆载体中提取基因,克隆,载体构建,测序正确20个工作日
慢病毒包装抽提、包装与浓缩、滴度测定15个工作日
获取稳定感染株将慢病毒感染目的细胞,并通过嘌啉霉素筛选出稳定感染株20个工作日
目的基因上调效率鉴定通过western blot鉴定目的基因上调效率10个工作日

基因下调
项目内容周期
慢病毒穿梭载体构建将三条shRNA分别构建至慢病毒干扰载体,测序成功20个工作日
病毒包装抽提、包装与浓缩、滴度测定15个工作日
获取稳定感染株将慢病毒感染目的细胞,并通过嘌啉霉素筛选出稳定感染株,目的细胞由客户提供20个工作日
目的基因干扰效率鉴定通过western blot鉴定目的基因上调效率10个工作日














慢病毒载体图


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